經(jīng)研究證實(shí)，終末期腎病（ESRD）患者存在氧化損傷增強(qiáng)。ESRD患者體內(nèi)某些細(xì)胞因子（IL-1、IL-6、TNF等）分泌增加，可使中性粒細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞的呼吸爆發(fā)活動增強(qiáng)，活性氧（ROS）和活性氮（RNS）大量生成。

       ROS和RNS可攻擊細(xì)胞內(nèi)任何結(jié)構(gòu)和物質(zhì)，包括：DNA。DNA氧化損傷產(chǎn)物中，作為DNA中脫氧鳥苷（dG）的羥基加合物，8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）因其形成量大，影響因素少，已被*為zui能反映體內(nèi)DNA氧化損傷程度的生物標(biāo)志物。然而目前對ESRD的DNA的氧化損傷研究尚少。本研究通過檢測血清中的8-OHdG含量來了解ESRD患者體內(nèi)DNA氧化損傷程度，同時研究不同病因（慢性腎小球腎炎和糖尿病）所致ESRD在DNA氧化損傷程度上是否有差別，以及血液透析和抗氧化治療對DNA氧化損傷的影響。本研究還檢測了ESRD患者一氧化氮（NO）和丙二醛（MDA）的含量，并通過與8-OHdG比較，來了解DNA氧化損傷與其他物質(zhì)氧化損傷的相關(guān)性。以此達(dá)到探討ESRD患者體內(nèi)氧化損傷的機(jī)制，并為ESRD的抗氧化治療提供理論依據(jù)的目的。 實(shí)驗(yàn)材料與方法 一、實(shí)驗(yàn)材料 1．主要試劑與儀器 8-OHdG ELISA試劑盒購自日本防老化研究所（Japan Institute For The Control Of Aging）；鎘顆粒購自上海化學(xué)試劑站；722光柵分光光度計(jì)（上海第三分析儀器廠）；酶標(biāo)儀（芬蘭產(chǎn)，Multi-skan Ascent牌） 二、實(shí)驗(yàn)方法 二．研究對象： 分四組，每組10例。除正常對照組外，其余三組為實(shí)驗(yàn)組。*組為正常對照組。第H組為慢性腎小球腎炎導(dǎo)致ESRD未接受血液透析治療組＊N非透析組人第三組為糖尿病導(dǎo)致ESRD末接受血液透析治療組pM非透析組八第四組為慢性腎小球腎炎導(dǎo)致ESRD接受血液透析治療組＊N透析組人 以上各組除第四組外，所有受檢者均要求無吸煙史，無腫瘤病史；近一月無感染史，近一月無口服VOVD鐵劑史。第四組均為接受血液透析治療三個月以上，要求除口服VOV卜鐵劑史外，其余同其他三組。 2．檢測方法： 8－OHdG檢測采用 ELISA試劑盒法，依次加人*抗體液、第二抗體液后，再加人發(fā)色劑及反應(yīng)停止液，然后酶標(biāo)儀波長450run處8－OHdG定量分析。NO采用檢測改良鍍銅輻顆粒還原法。MDA檢測采用硫代巴比妥酸產(chǎn)物比色法。 三、統(tǒng)計(jì)分析 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS．0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行描述分析t檢驗(yàn)及數(shù)據(jù)相關(guān)分析，數(shù)據(jù)以 i幻表示，p＜0．05為統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義。 結(jié) 果 一、各組間血清 8－OHdGJDA和 NO測量值 l．各組的血清8－OHdG水平 GN非透組刀M非透組人N透析組血清中8—OHdG水平均顯著高于正常對照組，p＜0．0L但各實(shí)驗(yàn)相比鰍顯著差異，p＞0．05。 ·2·． 2．各組的血清MDA水平 GN非透組山M非透組血清中MDA水平均顯著高于正常對照組，p＜0．of。實(shí)驗(yàn)組中 GN非透組與 GN透析組相比差異顯著，P＜0．01。 3．各組的血清NO水平 GN非透組山M非透組血清中NO水平均顯著高于正常對照組，其中＊N非透組對比正常對照組p＜o(jì)．o＼＊M非透組與正常對照組比 p＜0．05。但 GN非透組的 NO水平明顯高于 DM非透組，差異顯著，p北·01。 二、不同氧化損傷指標(biāo)與肌酥的相關(guān)分析 l．血清8－OHdG值同NO和o值呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0．379和0．596。其中 8－OHdG值和 Cr值呈較強(qiáng)正相關(guān)，P＜0．of。 2．血清 NO值與 Cr值呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0．378，P＜0．05。 討 論 關(guān)于DNA氧化損傷的研究是近幾年才開展起來的。在DNA氧化損傷產(chǎn)物中，8－OHdG產(chǎn)生量zui多。8－OHdG為 DNA中 dG的羥基（·OH）加合物。。OH的生成方式主要是Fenton反應(yīng)（H。O。＋Fe‘“一＋HO＋Fe’”＋·OH），其中鐵離子發(fā)揮著重要作用。以前8—OHdG的檢測復(fù)雜，費(fèi)用昂貴，限制了8－OHdG的應(yīng)用。1997年日本防老化研究所研究出 ELISA方法檢測 8－OHdG，可直接檢測血清中的8－OHdG含量，大大地提高了8－OHdG作為一個DNA氧化損傷指標(biāo)的應(yīng)用，本研究也是基于此方法研究ESRD中 DNA氧化損傷水平。 我們的研究結(jié)果顯示在ESRD患者8－OHdG水平明顯高于 ·3·正常對照組。而且8－OHdG同患者體內(nèi)Cr水平明顯正相關(guān)，說明ESRD患者DNA氧化損傷增強(qiáng)是腎功能衰竭的結(jié)果。ESRD患者有多種因素導(dǎo)致Fenton反應(yīng)增強(qiáng)。這些因素包括：ESRD患者促紅細(xì)胞生成素減少等原因?qū)е妈F的利用減少和轉(zhuǎn)運(yùn)障礙。鐵元素蓄積；患者營養(yǎng)不良、蛋白合成減少、體內(nèi)微量元索硒重度減低等原因，導(dǎo)致GSH－PX和GSH抗氧化系統(tǒng)功能低下，體內(nèi)·OH清除減少；SODJO＊抗氧化物缺乏等。

    本研究發(fā)現(xiàn)GN非透組和DM非透組之間8—OHdG的水平無差別，這與目前的一些研究結(jié)果不同。之所以不同的原因，我們考慮可能是因?yàn)闄z測標(biāo)本有差別。（轉(zhuǎn)自 論文網(wǎng)）